《人生双行线》通过铁路系统改革，四次铁路大提速，青藏铁路建设，以及建设和谐铁路的故事，来反映时代主旋律，反映现代铁路人的精神风貌、改革成果。该剧通过刻划讴歌以李抒为代表的两代铁路人，从不同角度展现了当代铁路人积极向上的精神风貌，通过讲述铁路干线各岗位工作人员的感人事迹，赞美了他们默默奉献无所求的自我牺牲精神。

梅勒尼和艾丽是一对13岁的双胞胎，她们心地善良，聪明可爱，但性情不羁，对未来有着自己的打算和想法。在学校里两人功课学得很好，但是她们更渴望可以学到更多书本上没有的知识，比如如何与人相处。

简和罗克茜是一对姐妹，但是两个女孩的关系却并不算融洽。假期两个人都计划从家乡长岛到纽约旅行，成绩出色的简想利用这个机会拿到一笔学生会的奖学金，而反叛的罗克茜则是想溜到演唱会后台一睹仰慕已久的摇滚歌星。结果没想到路上发生了很多意外，使得这对性情目标迥然不同的姐妹不情愿地走到一起……